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Cyanine菁染料用于小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)步驟和方法

首先我們用不同的活性基團(tuán)的Cyanine菁染料和相應(yīng)的活性基團(tuán)的生物分子或小分子藥物發(fā)生反應(yīng)，鏈接到一起。

Cyanine3 NHS ester和帶NH2的藥物分子連接

Cyanine7 maleimide和帶SH的藥物分子或生物分子連接

Cyanine5 amine和帶NHS的藥物分子或小分子連接

Cyanine5.5 azide和Cyanine3.5 alkyne用于連接DNA和oligonucleotides

Cyanine3/5/7-藥物分子或小分子多肽用于小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)步驟如下：

SPF級 BALB/C裸鼠，6～8 周齡, 18～20克, 實(shí)驗(yàn)前24 h 自由進(jìn)食、飲水。

于實(shí)驗(yàn)裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動物。將裸鼠俯臥位平放于小動物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。

實(shí)驗(yàn)時將Cy7 或Cy7 標(biāo)記的生物分子或藥物DMSO 稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g) [最佳用量和時間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化] ,每5min 記錄1張動物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對照鼠不注射藥物，進(jìn)行同時記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器，進(jìn)行成像。

Cy7 檢測時激發(fā)波長700～770 nm 帶通 ,發(fā)射波長790 nm 長通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780～950 nm ,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時間為500 ms。

不同的藥物代謝時間不一樣，注射入裸鼠體內(nèi)，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現(xiàn)顯著的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6 小時，快得只有30 分鐘;如果是骨骼等部位靶點(diǎn)的Cy7 標(biāo)記藥物，有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測到熒光成像。

器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小時以上，0%，20%，30%PBS 蔗糖依次沉底，20μm 切片，多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片，晾干，DAPI 染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖 633 nm。

西安瑞禧生物科技有限公司產(chǎn)品種類：

Cyanine3 alkyne

Cyanine3 azide

Cyanine3 carboxylic acid  1144107-76-5

Cyanine3 hydrazide

Cyanine3 maleimide

Cyanine3 NHS ester   1032678-38-8

Cyanine3.5 azide

Cyanine3.5 carboxylic acid  1144107-79-8

Cyanine3.5 NHS ester

Cyanine5 alkyne

Cyanine5 amine

Cyanine5 azide

Cyanine5 Boc-hydrazide

Cyanine5 carboxylic acid

Cyanine5 hydrazide

Cyanine5 maleimide

Cyanine5 NHS ester  1032678-42-4

Cyanine5.5 alkyne

Cyanine5.5 azide

Cyanine5.5 carboxylic acid  1144107-80-1

Cyanine5.5 maleimide

Cyanine5.5 NHS ester

Cyanine7 amine   1650635-41-8

Cyanine7 azide

Cyanine7 carboxylic acid

Cyanine7 maleimide

Cyanine7 NHS ester

Cyanine7.5 amine

Cyanine7.5 azide

Cyanine7.5 carboxylic acid   1686147-68-1

Cyanine7.5 maleimide

Cyanine7.5 NHS ester

Sulfo-Cyanine 5 NHS ester

Sulfo-Cyanine3 azide

Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine3 maleimide

Sulfo-Cyanine3 NHS ester

Sulfo-Cyanine5 alkyne

Sulfo-Cyanine5 azide

Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid   1121756-16-8

Sulfo-Cyanine5 maleimide

Sulfo-Cyanine7 azide

Sulfo-Cyanine7 carboxylic acid

Sulfo-Cyanine7 NHS ester

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